Միկրոսկոպիկ մեթոդները Միկրոբիոլոգիայի

представляют собой способы изучения разнообразных объектов с использованием специального оборудования. Միկրոսկոպիկ հետազոտական մեթոդների եղանակներ ուսումնասիրել է մի շարք օբյեկտների օգտագործման հատուկ սարքավորումների. Այն թույլ է տալիս հաշվի առնել կառուցվածքը նյութերի եւ օրգանիզմների այդ պատասխանատվության չափը, որը սահմաններից դուրս լուծման մարդկային աչքով: Հոդվածում համառոտ վերլուծությունը միկրոսկոպիկ մեթոդների.

overview

используют в своей практике разные специалисты. Ժամանակակից մեթոդները միկրոսկոպիկ ուսումնասիրության օգտագործելով տարբեր փորձագետներ իրենց պրակտիկայում: Նրանց թվում են վիրուսաբանները, բջջաբանության արյունաբանական, ձեւաբանություն, եւ այլք: Հիմնական մեթոդները միկրոսկոպիկ քննության հայտնի են երկար ժամանակ. Առաջինն այն է, մի թեթեւ միջոց է նայում օբյեկտների. Վերջին տարիներին, ակտիվորեն շրջանառության մեջ են դրվել գործնականում, եւ այլ տեխնոլոգիաների. . Այսպիսով, ժողովրդականությունը ձեռք բերված փուլային-հակադրություն, luminescent, միջամտության, բեւեռացման, ինֆրակարմիր, ուլտրամանուշակագույն, ստերեոսկոպիկ մեթոդով հետազոտության. Բոլորն էլ հիմնված են մի շարք հատկությունների լույսի. . Բացի այդ, լայնորեն օգտագործվում էլեկտրոնային միկրոսկոպիայի մեթոդների. Այս մեթոդները թույլ են տալիս դրսեւորել օբյեկտների օգտագործելով Ուղղորդված հոսքը լիցքավորված մասնիկների. Հարկ է նշել, որ այդ ուսումնասիրության մեթոդները օգտագործվում են ոչ միայն կենսաբանության եւ բժշկության. в промышленности. Բավական տարածված մեթոդը միկրոսկոպիկ ուսումնասիրության մետաղների եւ համաձուլվածքների արդյունաբերության. Սա թույլ է տալիս ուսումնասիրությունը գնահատելու վարքագիծը միացությունների արտադրել տեխնոլոգիաներ, նվազագույնի հասցնելու հավանականությունը Կոտրվածք եւ աճել ուժով:

Թեթեւ ուղիները: բնութագրեր

и других объектов базируются на различной разрешающей способности оборудования. Նման մանրադիտակային մեթոդներ ուսումնասիրելու միկրոօրգանիզմների եւ այլ հարմարություններ հիման վրա տարբեր բանաձեւի սարքավորումների Կարեւոր գործոն է ուղղությունը beam բնութագրերի օբյեկտի բուն. Վերջինս, մասնավորապես, կարող է լինել թափանցիկ կամ անթափանց: Ի համաձայն հատկությունների օբյեկտի, փոխելով ֆիզիկական հատկությունների, ինչպես նաեւ թեթեւ հոսքի - պայծառությունն ու գույն պատճառով առատություն եւ ալիքի երկարության, ինքնաթիռի, փուլ եւ ուղղության ալիքի տարածման: . Օգտագործման վերաբերյալ այդ հատկանիշներով եւ կառուցել տարբեր միկրոսկոպիկ մեթոդները:

կոնկրետություն

Է ուսումնասիրել ուղիները թեթեւ օբյեկտ, սովորաբար վիտրաժներ: Սա ստիպում է դա հնարավոր է բացահայտել եւ նկարագրել այս կամ այլ հատկությունները. Անհրաժեշտ է, որ հյուսվածք է արձանագրվել, քանի որ գունավորում են որոշակի կառույցներ բացառապես բջիջների սպանված: Ապրելով բջիջները առանձնացնել մի ներկ է ձեւով vacuoles է cytoplasm. Նա չի նկարում է ավելի կառույցի: Բայց կենդանի օբյեկտների եւ կարող է հետազոտվել օգտագործելով թեթեւ մանրադիտակով. Այդ նպատակի համար, կենսական ճանապարհը սովորելու. Նման դեպքերում, ա darkfield կոնդենսատոր. Այն ներդրված է թեթեւ մանրադիտակով.

Ուսումնասիրում Չներկած օբյեկտները

Այն իրականացվում է փուլ կոնտրաստային microscopy. Այս մեթոդը հիմնված է դիֆրակցիան փնջի մեջ համապատասխան բնութագրերի օբյեկտի. Ընթացքում բացահայտման նշանավորվեց փոփոխություն փուլ, եւ ալիքի. Ի մանրադիտակ ոսպնյակի ներկա կիսաթափանցիկ ափսե: Ապրել կամ ֆիքսված, բայց ոչ ներկված օբյեկտները շնորհիվ իր թափանցիկության, գրեթե չեն փոխել գույնը, եւ առատություն է փնջի անցնող նրանց, հրահրելու միայն հերթափոխը ալիքի փուլում. Բայց այս դեպքում, հետո անցնում է օբյեկտի, ապա լույսի հոսքը deflected է ափսեի. Որպես հետեւանք, միջեւ ճառագայթների, անհայտ բացակայող միջոցով օբյեկտի եւ մտնելով մի թեթեւ ֆոնին, որ ալիքը երկարությունը տարբերությունը տեղի է ունենում: Մի որոշակի արժեքի իր տեսողական էֆեկտի առաջանում մութ օբյեկտ կլինի հստակ տեսանելի է մի թեթեւ ֆոնին, կամ հակառակը (համաձայն բնութագրիչների փուլային ափսեի): Ստանալու այդ տարբերությունը պետք է լինի առնվազն 1/4 ալիքի.

Anoptralny մեթոդը

Նա մի տեսակ փուլ-կոնտրաստային մեթոդով. Anoptralny մեթոդը ներառում է օգտագործման ոսպնյակի հատուկ սալերի, որոնք փոխել միայն գույնը ու պայծառությունը շրջակա լույսի. Սա մեծապես ընդլայնում է հնարավորությունները ուսումնասիրելու unstained կենցաղային օբյեկտների. , паразитологии при изучении растительных и животных клеток, простейших организмов. Կիրառական փուլ հակադրություն մանրադիտակ մեթոդը հետազոտությունների մանրէաբանության, պարազիտոլոգիա ուսումնասիրության բույսերի եւ կենդանիների բջիջների, Protozoa: Ի հեմատոլոգիայի մեթոդի, որն օգտագործվում է հաշվարկել եւ որոշել տարբերակմանը արյան բջիջների եւ ոսկրածուծի.

խափանումներ տեխնիկաներ

решают в целом те же задачи, что и фазово-контрастные. Այս միկրոսկոպիկ հետազոտական մեթոդները, ընդհանուր առմամբ, լուծել նույն խնդիրները, ինչպես փուլային հակադրություն: Սակայն, վերջին դեպքում, փորձագետները կարող է միայն դիտարկել ուրվագիծն օբյեկտների. методы исследования позволяют изучать их части, выполнять количественную оценку элементов. Ինտերֆերենցային միկրոսկոպիկ հետազոտական մեթոդները թույլ են տալիս մեզ ուսումնասիրել իրենց մասը, իրականացնել մի քանակական գնահատման տարրեր: Դա հնարավոր է պայմանավորված է պառակտող թեթեւ հաղորդագրությունները Beam. Մեկ հոսքի անցնում մասնիկի օբյեկտի, իսկ մյուս կողմից `. Ի ակնապակի մանրադիտակով նրանք հանդիպում եւ միջամտել: Որ արդյունքում փուլը տարբերությունը կարող է որոշվել, ըստ կշռի տարբեր բջջային կառույցների. Երբ հաջորդական չափման հետ կանխորոշված refractive ցուցանիշից կարող է սահմանվել հաստ չամրագրված հյուսվածքների եւ կենդանի օբյեկտ, իսկ սպիտակուցը դրա բովանդակության, կոնցենտրացիան չոր եւ սառը ջուր, եւ այլն: Համաձայն ստացված տվյալների մասնագետների կարողանում են անուղղակիորեն գնահատել մեմբրանային permeability, enzyme գործունեությունը, բջջային նյութափոխանակությունը:

բեւեռացումը

Այն իրականացվում միջոցով Նիկոլ պրիզմաների կամ filmy polaroids: Դրանք տեղադրված միջեւ նմուշի եւ թեթեւ աղբյուր: позволяет изучать объекты с неоднородными свойствами. Polarizing մանրադիտությունը մեթոդը Հետազոտություններ մանրէաբանության բնագավառում թույլ է տալիս ուսումնասիրել օբյեկտների հետ այսպիսի անհամասեռ հատկություններով. Ի isotropic կառույցների արագությունը բազմացման լույսի անկախ ընտրված հարթությունում. Ի անիզոտրոպ համակարգերի փոխարժեքի տատանվում ըստ լույսի կողմնորոշված երկայնքով լայնակի կամ երկայնական առանցքի օբյեկտի. Եթե refractive ինդեքս արժեքը երկայնքով կառույցի կլինի ավելի մեծ, քան երկայնքով լայնակի, ստեղծում է դրական կրկնակի բեկում. Սա բնորոշ է բազմաթիվ կենսաբանական օբյեկտների, որոնք գտել է խիստ մոլեկուլային կողմնորոշում: Նրանք բոլորն էլ անիզոտրոպ: Այս կատեգորիայի, մասնավորապես, myofibrils, neurofibrils, թարթիչ է թարթիչավոր էպիթելի, collagen մանրաթելեր, եւ այլոց:

բեւեռացումը արժեքը

Համեմատության բնույթից ճառագայթման եւ refractive ցուցանիշից անիզոտրոպիայի օբյեկտի դարձնում այն հնարավոր է գնահատել մոլեկուլային կառուցվածքը կազմակերպության: Բեւեռացումը մեթոդը ծառայում է որպես մեկը հյուսվածքաբանական վերլուծության մեթոդների, որոնք օգտագործվում են cytology եւ այլն: Ոչ միայն նկարել օբյեկտները կարող են ուսանել է լույսի: Բեւեռացումը մեթոդը հնարավոր է դարձնում ուսումնասիրել unstained եւ unfixed - իսպանախոս - նախապատրաստական հյուսվածքների բաժինների:

ցերեկային լույսի տեխնիկաներ

Դրանք հիմնված են հատկությունների որոշակի օբյեկտների կենդանություն է կապույտ-մանուշակագույն մասը սպեկտրի կամ ուլտրամանուշակագույն ճառագայթների. Շատ նյութեր, ինչպիսիք են սպիտակուցների, որոշ վիտամինների, կոֆերմենտներից, դեղերի, օժտված է առաջնային (en) լուսարձակում: Այլ օբյեկտների սկսում է շիկանալ ավելացնելով fluorochrome - հատուկ ներկերի. Այդ հավելումները կարող են ընտրողաբար ցրված կամ բաժանվում առանձին բջջային կառուցվածքների կամ քիմիական միացությունների. Այդ գույքը հիմքը օգտագործման ցերեկային լույսի microscopy հետ histochemical եւ բջջաբանական հետազոտությունների:

Ոլորտները օգտագործման

Օգտագործելով իմունոֆլորեսցենտային լուսածորում փորձագետները հայտնաբերել վիրուսային ՀԱԿԱԾԻՆՆԵՐ եւ նրանց կոնցենտրացիան ճշգրտվում են հայտնաբերվել վիրուսներ հակահամաճարակային մարմիններին եւ անտիգենների, հորմոններ, տարբեր նյութափոխանակության ապրանքներ եւ այլն. Այս առումով, ախտորոշումը հերպեսի, խոզուկ, հեպատիտ B, գրիպի եւ այլ վարակների օգտագործելով ֆլյուորեսցենտային մեթոդները նյութերի հետազոտության. иммуно-флуоресцентный способ позволяет распознавать опухоли злокачественного характера, определять ишемические участки в сердце на ранних этапах инфаркта и пр. Միկրոսկոպիկ իմունոֆլորեսցենտային ցերեկային մեթոդը detects ուռուցք կործանիչ, որոշելու, թե իշեմիկ ոլորտները սրտի վաղ փուլերում է սրտի կաթվածից եւ այլն:

Օգտագործումը ուլտրամանուշակագույն

Այն հիմնված է ունակության մի շարք նյութերի բջջի կամ միկրոօրգանիզմների ամրագրված են, բայց անգույն թափանցիկ տակ տեսանելի թեթեւ կտորներից կլանել ուլտրամանուշակագույն ճառագայթներ մի կոնկրետ ալիքի. Սա ճիշտ է, մասնավորապես, բարձր մոլեկուլային միացությունների. Դրանք ներառում են սպիտակուցներ, անուշաբույր թթուներ (methylalanine, տրիպտոֆան, թիրոզին, եւ այլն), nucleic թթուներ եւ purine հիմքերը piramidinovye եւ այլն: ՈՒՄ մանրադիտությունը թույլ է տալիս նշեք, գտնվելու վայրը եւ համարը այդ միացությունների. Ուսումնասիրության կենդանի բաների մասնագետները կարող են դիտարկել այն փոփոխությունները, իրենց metabolic գործընթացներում:

լրացուցիչ

Ինֆրակարմիր մանրէադիտում օգտագործվում է ուսումնասիրության անթափանց է լույս, եւ ուլտրամանուշակագույն ճառագայթները միջոցով կլանման օբյեկտների հոսում օբյեկտ, որոնց ալիքի 750-1200 նմ. Կիրառել այս մեթոդը կարիք չկա նախապես բացահայտել թմրանյութ է քիմիական բուժում. Որպես կանոն, այդ IR մեթոդը օգտագործվում է մարդաբանության, ԳԱԱ կենդանաբանության եւ այլ գիտությունների ոլորտում. Ինչ վերաբերում է բժշկության, այս մեթոդը օգտագործվում է հիմնականում ակնաբուժական եւ Neuromorphology: Ուսումնասիրության ծավալային օբյեկտների օգտագործելով ստերեոսկոպիկ մանրադիտակով. ապարատային նախագծում թույլ է տալիս մոնիտորինգի ձախ եւ աջ աչքի է այլ տեսանկյունից: Անթափանց օբյեկտներ են հետազոտվել է համեմատաբար ցածր խոշորացում (120 անգամ ժամը Ամենա): Ստերեոսկոպիկ մեթոդները օգտագործվում են միկրովիրաբուժության Pathomorphology է դատական բժշկության.

էլեկտրոն մանրադիտությունը

Այն օգտագործվում է ուսումնասիրել կառուցվածքը բջիջների եւ հյուսվածքների է macromolecular եւ subcellular մակարդակներում. Էլեկտրոնային մանրադիտությունը մեզ թույլ տվեց, որպեսզի որակական թռիչք ոլորտում հետազոտության. Այս մեթոդը լայնորեն օգտագործվում է կենսաքիմիայի, ուռուցքաբանություն, վիրուսաբանության, ձեւաբանության, իմունոլոգիայի, գենետիկայի, եւ այլ ոլորտներում: Զգալի բարձրացումն բանաձեւի կողմից տրամադրված սարքավորումների կարողությունների հոսքի էլեկտրոնների, որոնք անցնում են վակուումային էլեկտրամագնիսական դաշտի: Վերջինս, իր հերթին, ստեղծել հատուկ ոսպնյակներ. Էլեկտրոնները կարող են անցնել կառուցվածքի օբյեկտի կամ արտացոլվում է նրանց հետ շեղումների տարբեր անկյուններից: Արդյունքն ակնառու է, ցուցադրվում է ցերեկային լույսի էկրանին սարքի. Եթե փոխանցման մանրադիտությունը Սոսի տեսություն ձեռք բերել, երբ սկանավորման համապատասխանաբար շրջապատում:

նախադրյալներ

Հարկ է նշել, որ մինչ անցնում էլեկտրոնային միկրոսկոպիկ փորձաքննության, օբյեկտ ենթարկվում է հատուկ ուսուցում: Մասնավորապես, ֆիզիկական կամ քիմիական ամրագրման հյուսվածքների եւ օրգանիզմների. Սեկցիոն բիոպսիա նյութական եւ, ի լրումն, dewatered, ներդրված է epoxy խեժ, կտրել ապակե կամ ադամանդի դանակներ Ultrathin հատվածներում: Ապա նրանց հակադրություն եւ ուսումնասիրություն: The սկան մանրադիտակ ուսումնասիրում մակերեւույթը օբյեկտների. Որպեսզի դա անել, նրանք sprayed հատուկ նյութ է վակուումային պալատի.