ՊՇՌ վերլուծություն, թե ինչ է դա: Թե ինչպես կարելի է վերցնել PCR վերլուծություն

Այն ոչ այնքան վաղուց մշակվել է հուսալի, բարձր զգայուն եւ արագ մեթոդը ախտորոշման տարբեր վարակիչ հիվանդությունների մարդկանց: Նման մեթոդը կոչվում է «ՊՇՌ վերլուծություն»: Ինչ է այն, թե ինչ է նրա էությունը, ինչ նա կարող է բացահայտել միկրոօրգանիզմների եւ թե ինչպես պետք է վերցնել այն, որ մենք պետք է նկարագրել այս հոդվածում.

Պատմությունը հայտնաբերելու

Հորինել են, պոլիմերազային շղթայական ռեակցիայի (ՊՇՌ), ամերիկացի գիտնական Քեռի Myullis է 1983 թ .: Սկզբում, որ արտոնագրված մեթոդը ախտորոշման է «ԿԵՏՈՒՍ կորպորացիայի», որտեղ նա աշխատել է եւ դրա ստեղծող: Սակայն 1992-ին բոլոր իրավունքներն ու արտոնագրերը, որոնք վաճառվել են ընկերության «Hoffman-La Roche»: Դրանից հետո, պարզվել է, որ նմանատիպ ուսումնասիրություններ են իրականացվել զուգահեռ եւ էին հաղորդում են ամերիկյան այլ գիտնականներ, ինչպիսիք են Elis Չենը, Դավիթ Էդգարը, Ջոն RRE. 1980 թ. Այդ հարցով զբաղվում է եւ խորհրդային գիտնականների Ա. Slyusarenko Ա. Kaledin եւ Ս. Gorodetsky: Հետեւաբար, որոշելու միակ հեղինակային իրավունքի սեփականատերը չի եղել, հնարավոր. Շատ նշանավոր Կենսաքիմիկոսների նպաստել են զարգացման մեթոդների պոլիմերազային ռեակցիայի եւ CERN արտոնագրված իրենց նորամուծություններ: Այս պահին վերլուծության PCR իրականացվում ողջ հատուկ սարքավորված լաբորատորիաներ:

ԱՄՓՈՓՈՒՄ PCR ախտորոշիչ

ՊՇՌ վերլուծություն, թե ինչ է այն, եւ ինչպես է դա աշխատում? Էությունը մեթոդի կայանում է նրանում, որ, օգտագործելով հատուկ ֆերմենտը ԴՆԹ պոլիմերազային է vitro է ծավալների մեծացման որոշակի մանրէաբանական միջավայրում: Որպեսզի դա անել, այս մասին բազմիցս բազմանան մատչելի ԴՆԹ նյութական. Այսպիսով, ներկայությունը մի pathogen մի նմուշ է, որ գումարը կարող է ավելանալ հաշվին բիոքիմիական լաբորատոր մանիպուլյացիայի, եւ բակտերիաների չի լինի դժվար է հայտնաբերել, որ մանրադիտակով.

Թե ինչպես է ուսումնասիրություն նյութի.

Է իրականացնել վերլուծություն անհրաժեշտ:

• ԼԱՄ-ի կաղապարը.
• Նախաներկեր նյութական կապող ծայրերում հատված.
• Ջերմակայուն ԴՆԹ պոլիմերազային enzyme.
• քիմիկատներ, ապահովել պատշաճ գործունեությունը enzymes.
• բուֆեր լուծում է պահանջվում է ստեղծել համապատասխան պայմաններ աճի եւ զարգացման ԴՆԹ նյութական.

Է կատարել PCR գործել 25-30 կրկնվում, որը բաղկացած է երեք քայլերը: դենատուրացիա, կռելու եւ երկարացումն:

Է վերլուծել polimezarnoy շղթայական ռեակցիա, օգտագործելով հատուկ սարք - cycler. Ժամանակակից սարքավորումներ թույլ է տալիս Ձեզ տեղադրել անհրաժեշտ ջեռուցման եւ հովացման խողովակների ծրագիր վերացնելու սխալներ ախտորոշման ժամանակ:

Որտեղ են կիրառել ախտորոշումը:

Polimezarnoy շղթայական ռեակցիա մեթոդը օգտագործվում են տարբեր ոլորտներում բժշկության:

• Դատաբժշկական օգտագործել այն բացահայտել գենետիկական նյութ, ինչպես օրինակ, մազերի, թուք կամ արյան,
• PCR վերլուծություն արյան օգնում է Genotyping, օրինակ հայտնաբերման համար անհատական գենետիկ տնկված պատասխան որոշակի դեղամիջոցի.
• մի մեթոդով սահմանված ընտանեկան կապերի մարդկանց միջեւ.
• ամենապահանջված-ՊՇՌ մեթոդը դարձել է բժշկական ախտորոշման համար որոշման տարբեր ինֆեկցիոն հիվանդությունների.

Ինչ է վարակների բացահայտում ՊՇՌ.

Այսպիսով, բժշկության վաղուց արդեն հաջողությամբ օգտագործվել PCR վերլուծություն: Ինչ է դա, մենք արդեն սովորել. Եւ որոշ pathogens կարող է հայտնաբերել դրա հետ. PCR ախտորոշվել հետեւյալ վարակների :

• հեպատիտ A, B, C,
• ureaplasmosis;
• candidiasis;
• Chlamydia;
• միկոպլազմոզ,
• ԲԱԿՏԵՐԱՅԻՆ vaginosis;
• վարակիչ mononucleosis;
• տրիխոմոնազը;
• HPV վարակը;
• տուբերկուլյոզի;
• հերպես վարակ է 1-ին եւ 2-րդ տեսակի.
• Helicobacter pylori վարակը.
• ցիտոմեգալովիրուսի;
• դիֆտերիա,
• salmonellosis;
• ՄԻԱՎ վարակի.

Բացի այդ, ՊՇՌ օգտագործվում են քաղցկեղի ախտորոշման.

առավելությունները մեթոդի

Ախտորոշիչ PCR ունի մի շարք առավելություններ:

1. Բարձր զգայունության: Նույնիսկ ընդամենը մի քանի ԴՆԹ մոլեկուլները միկրոօրգանիզմի ՊՇՌ վերլուծություն որոշում է ներկայությունը վարակի. Այն օգնում է մեթոդ քրոնիկ եւ լատենտ հիվանդությունները տեղի. Հաճախ նման դեպքերում, միկրոօրգանիզմը անմշակ են այլ ձեւերով:
2. Որպեսզի հետաքննել ցանկացած հարմար նյութ, ինչպես օրինակ, թուք, արյան, սեռական ընտրության, մազերի, epithelial բջիջների. Առավել տարածված է արյան թեստ եւ urogenital շվաբր ՊՇՌ.

3. Չի պահանջում ընդլայնված աճող մշակույթների. Ավտոմատացված գործընթացը ախտորոշման թույլ է տալիս ձեռք բերել հետազոտության արդյունքները հետո 4-5 ժամվա ընթացքում:
4. Մեթոդը գրեթե ամբողջությամբ վավերական են. Արձանագրվել միայն եզակի դեպքերը կեղծ-բացասական արդյունք:
5. Հնարավորություն է բացահայտել մի քանի տեսակի pathogens մեկ ընտրանքային նյութական. Սա ոչ միայն արագացնում է գործընթացը ախտորոշման հիվանդության, այլ նաեւ զգալիորեն նվազեցնում նյութական ծախսերը. Հաճախ, բժիշկը սահմանում է մի համապարփակ վերլուծություն PCR: Գին հետազոտությունը, որը բաղկացած է որոշելու վեց pathogens, կազմում է մոտ 1500 ռուբլի:

Առաջարկություններ նախապատրաստող վերլուծության

Արդյունքները լինեն վավեր է ՊՇՌ ուսումնասիրությունները պետք է փորձարկվել, հետեւելով առաջարկություններին նախնական նախապատրաստական աշխատանքները ախտորոշման:

1. Նախքան առաքման թուք պետք է զերծ մնան ուտելու եւ թմրամիջոցների 4 ժամ առաջ նմուշառում նյութը: Անմիջապես առաջ ընթացակարգի, ողողում ձեր բերանը եռացրած ջուր:
2. Վերը նշված կանոնները պետք է առաջնորդվի, եւ երբ հաշվի նմուշը ներսից այտը: Հետո rinsing խորհուրդ է տրվում իրականացնել մի թեթեւ մերսում մաշկի վրա ազատ արձակել Շագանակագեղձի secretions.
3. Մեզի, որը սովորաբար հավաքվում է տանը: Որպեսզի դա անել, դուք պետք է անցկացնել մանրակրկիտ զուգարան է սեռական օրգանների. Մի ստերիլ պլաստիկ կոնտեյներ անհրաժեշտ է հավաքել 50-60 մլ մեզի: Այն խորհուրդ է տրվում կանանց համար մտցրեք տամպոն մեջ vagina, եւ տղամարդիկ որքան հնարավոր է քաշեք մաշկը ապատիկի չափով է ապահովել անաղարտությունը նյութի: Դուք չեք կարող վերցնել նյութը ընթացքում menses.
4. Առաքման համար սերմնահեղուկի է ձեռնպահ մնալ սեռական հարաբերության ընթացքում 3 օր առաջ հավաքածուի նյութական. Բացի այդ, բժիշկները խորհուրդ են տալիս հրաժարվել օգտագործումը սաունա եւ տաք բաղնիք, ալկոհոլի եւ կծու սննդի. 3 ժամ առաջ, վերլուծության համար անհրաժեշտ է ձեռնպահ մնալ urinating:
5. Է անցնել միզասեռական արատ, օրինակ, եթե վերլուծություն վրա խլամիդիոզը PCR, թե կանայք, թե տղամարդիկ խորհուրդ է տրվում, որ սեռական հանգիստը 3 օրվա ընթացքում: 2 շաբաթ առաջ վերլուծության չի կարող վերցնել հակաբիոտիկի: Համար մի շաբաթ, դուք պետք է դադարեցնել, օգտագործելով ինտիմ գելեր, ointments, հեշտոցային մոմիկներ, ջրցան: 3 ժամ առաջ ուսումնասիրության պետք է զերծ մնան urinating: Դաշտանի ժամանակ պարիսպ նյութը չի իրականացվում, ընդամենը 3 օր անց դադարեցման հայտնաբերումն կարող եք վերցնել, միզասեռական արատ.

ՊՇՌ հղիության ընթացքում

Սպասում ժամկետը մի երեխա, շատ վարակիչ հիվանդություններ, սեռական ճանապարհով փոխանցվող հիվանդություններ, չափազանց վտանգավոր է նորմալ պտղի զարգացման համար: Սեռավարակների կարող է ձգան ներարգանդային զարգացման, անհաջողություն կամ վաղաժամ ծննդաբերել, բնածին արատներ երեխայի. Հետեւաբար, դա կարեւոր է ստանալ վաղ հղիության զննման ՊՇՌ: Pass վերլուծությունը անհրաժեշտ է, երբ գրանցելու - մինչեւ 12 շաբաթ:

Պարիսպ նյութական գալիս է արգանդի վզիկի ջրանցքի հատուկ խոզանակներ: Կարգը ցավ չպատճառող եւ որեւէ վտանգ չի է երեխային: Սովորաբար հղիության ընթացքում վերլուծվում է Chlamydia ՊՇՌ մեթոդով, ինչպես նաեւ ureaplasmosis, միկոպլազմոզ, Cytomegalovirus, հերպեսի, papillomavirus. Այդպիսի քննություն համալիրը կոչվում ՊՇՌ 6:

PCR համար ախտորոշման ՄԻԱՎ-ի

Պայմանավորված է այն հանգամանքով, որ այդ մեթոդը պոլիմերազային շղթայական ռեակցիայի շատ զգայուն է փոփոխությունների մարմնի եւ պայմանների ախտորոշման, բազմաթիվ գործոններ կարող են ազդել արդյունքի: Հետեւաբար PCR վերլուծություն ՄԻԱՎ վարակի չէ հուսալի մեթոդը, դրա արդյունավետությունը - 96-98%. The մնացած 2-4% -ը թեստի տալիս կեղծ դրական արդյունքներ:

Սակայն որոշ իրավիճակներում առանց ՊՇՌ ախտորոշման ՄԻԱՎ-չի կարող անել: Սովորաբար, այն իրականացվում է մարդկանց հետ, կեղծ-բացասական ELISA. Այդ գործիչները ցույց են տալիս, որ այդ անձը դեռեւս չի մշակվել հակամարմիններ վիրուսի եւ չի կարող լինել հայտնաբերվում առանց ավելացման թիվը բազմակի: Որ դա կարող է հասնել անցկացնելու արյան փորձարկման PCR մեթոդը:

Նաեւ անհրաժեշտ է ախտորոշում երեխաների կյանքի առաջին տարվա, ծնվել է ՄԻԱՎ-դրական մայրերից: Մեթոդը միակ ճանապարհն է հուսալիորեն կարգավիճակը որոշելու համար երեխայի.

PCR համար ախտորոշման հեպատիտ

Պոլիմերազային շղթայական ռեակցիայի մեթոդը թույլ է տալիս հայտնաբերման ԴՆԹ վիրուսի հեպատիտ A, B, C, նաեւ մինչեւ ձեւավորման հակամարմիններ ինֆեկցիոն կամ ախտանիշ սկզբից: Հատկապես արդյունավետ է ՊՇՌ վերլուծության վրա հեպատիտ C, քանի որ 85% - ը, նման հիվանդության ասիմպտոմատիկ եւ առանց ժամանակին բուժման խրոնիկական է դառնում:

Ճիշտ ժամանակին հայտնաբերման pathogen կօգնի խուսափել բարդություններից եւ երկարաժամկետ բուժում.

Ինտեգրված PCR ցուցադրություն

Համապարփակ ՊՇՌ վերլուծություն: ինչ է դա: Այս ցուցադրություն եղանակը polimezarnoy շղթայական ռեակցիան, որը ներառում է որոշելու միաժամանակ մի քանի տեսակներ վարակի: Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis, Gardnerella vaginalis, Candida, trichomonas, ցիտոմեգալովիրուսի, ureaplasma urealitikum, հերպես 1-ին եւ 2-րդ տեսակի, gonorrhea պապիլոմայի. Գինը այս ախտորոշման տատանվում է 2000-ից 3500 ռուբլի: կախված է կլինիկայում, նյութերի եւ սարքավորումների, ինչպես նաեւ տեսակից վերլուծության որակական կամ քանակական: Ինչ է անհրաժեշտ է ձեր դեպքում, - բժիշկը որոշում է. Որոշ դեպքերում, դուք պարզապես հայտնաբերելու ներկայությունը pathogen մյուսների, ինչպիսիք են ՄԻԱՎ-ի, կարեւոր դերը քանակական titer: կոչվում է որպես «ՊՇՌ-վերլուծության 12» - ի ախտորոշման բոլոր վերը նշված pathogens փորձաքննության:

Վերծանման վերլուծության արդյունքները

Արտագրելը PCR վերլուծությունը շիտակ: Կան միայն 2 ինդեքս scale - «դրական» եւ «բացասական»: Վերայ հայտնաբերման pathogen կարող բժիշկները 99% վստահության ՐԴ հաստատեք ներկայությունը հիվանդության եւ սկսել բուժումը հիվանդի: Քանակական մեթոդի որոշելու վարակի համապատասխան սյունակի ինդեքսը հայտնաբերվում բակտերիաների կհստակեցվեն: Միայն բժիշկը կարող է որոշել, թե որքանով է հիվանդության եւ նախատեսել անհրաժեշտ բուժում.

Որոշ դեպքերում, օրինակ, որոշելու ՄԻԱՎ-ով վարակի PCR, բացասական արդյունք, կա անհրաժեշտություն լրացուցիչ հարցումներ հաստատել այդ գործիչներին:

Որտեղ է ստանալ փորձարկվել.

Որտեղ է անցնել-PCR վերլուծությունը հանրային կլինիկայում կամ մասնավոր լաբորատորիայի. Ցավոք, քաղաքային բժշկական հաստատությունների սարքավորումներով եւ մեթոդներով հաճախ հնացած: Այնպես որ ավելի լավ է նախապատվությունը տալ մասնավոր լաբորատորիաների ժամանակակից սարքավորումներով եւ բարձր որակավորում ունեցող անձնակազմի. Բացի այդ, մի մասնավոր կլինիկայում դուք ստանում արդյունքները շատ ավելի արագ:

Մոսկվայում է, բազմաթիվ մասնավոր լաբորատորիաները առաջարկում PCR վերլուծություն տարբեր վարակների. Օրինակ, այնպիսի կլինիկաներում «Vita», «ինտեգրացված կլինիկայում,« «Երջանիկ ընտանիք», «Uro-Պրո», իրականացրել PCR վերլուծություն: Survey գինը 200 ռուբլի: որոշելու համար pathogen:

Կարելի է եզրակացնել, որ վարակիչ հիվանդությունների ախտորոշումը կողմից PCR շատ դեպքերում է արագ եւ հուսալի միջոց է ճանաչել pathogen մարմնի վաղ փուլերում վարակի. Այդուհանդերձ, որոշ դեպքերում, ընտրել այլ մեթոդներ ախտորոշման. Որոշելու անհրաժեշտությունը նման ուսումնասիրությունը կարող է լինել միայն մի մասնագետ: PCR վերլուծությունը Գաղտնազերծում նաեւ պահանջում է մասնագիտական մոտեցում: Հետեւեք ձեր բժշկի խորհրդով չեն տալիս իրենց սեփական թեստեր, որոնք չեն անհրաժեշտ.